UNEL是一种经典的细胞凋亡检测方法,凋亡细胞会发生DNA双链断裂,从而在断裂处暴露出3’-OH基团,利用荧光/化学基团标记的dUTP与3’OH基团结合后,可通过荧光成像/染色反应指示凋亡细胞。
细胞在发生凋亡时,会激活一些DNA内切酶,这些内切酶会切断核小体间的基因组DNA。细胞凋亡时抽提DNA进行电泳检测,可以发现180-200bp的DNA ladder。基因组DNA断裂时,暴露的3’-OH可以在末端脱氧核苷酸转移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT)的催化下加上荧光素(FITC)标记的dUTP (fluorescein-dUTP),从而可以通过荧光显微镜或流式细胞仪进行检测,这就是TUNEL (TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling)法检测细胞凋亡的原理。


